Evaluación de la expresión génica placentaria de Slc38a4 en ratones BALB/c bajo tratamiento con levetiracetam y correlación con niveles plasmáticos

Abstract

La epilepsia es una afección común en la mujer embarazada, aproximadamente 1 de cada 200 embarazadas se encuentra expuesto a fármacos antiepilépticos, siendo el levetiracetam (LEV) el fármaco de mayor uso durante el embarazo. La placenta es una barrera de circulación materna fetal, por lo que el grado de exposición fetal a sustancias exógenas será determinado por el transporte y la biotransformación a nivel placentario de dichas sustancias. El objetivo del presente trabajo fue determinar la expresión génica placentaria del gen Slc38A4 en ratones BALB/c y correlacionarlo con la concentración sérica de LEV. Se validó el método analítico por HPLC/UV para la cuantificación del fármaco, bajo lo establecido por la NOM-177-SSA1-2013, utilizando como estándar interno captopril y una columna fase reversa C18 (5 μm, 150 x 4,6 mm). La expresión génica se determinó en modelo murino (ratones hembra Balb-c preñadas), administrando una dosis de 100 mg/kg/día de LEV, el sacrificio fue a los 13 y 18 días de gestación. Se obtuvo sangre mediante punción cardiaca y se obtuvieron medidas antropométricas de los productos no natos, así como las placentas para extraer RNA y se evaluó la expresión del gen mediante q-PCR. También se cuantificó malondialdehído (MDA) para determinar el estrés oxidativo en hígado, riñón y productos fetales. El método analítico validado presentó exactitud, precisión, linealidad, selectividad y reproducibilidad en las siguientes condiciones cromatográficas: fase móvil ácido fosfórico 0.43%: acetonitrilo (90:10), pH 6.8, longitud de onda de 231 nm, flujo de 1.5 mL/min, volumen de inyección de 15 µl, tiempo de corrida de 8 min, tiempos de retención de 1.56 ± 0.07 y 3.9 ± 0.125 min para el estándar interno y LEV respectivamente. En relación con las medidas antropométricas de los productos no natos (número de productos, peso, talla y ancho), los resultados muestran un decremento en el número de productos en las ratonas expuestas a LEV en el día 13 de gestación, de igual manera, se observó un decremento en el peso y talla de los productos expuestos a LEV en comparación con los no expuestos. Referente a la peroxidación hepática, los animales gestantes presentaron concentraciones mayores de MDA que los no gestantes, de igual manera, los expuestos a LEV presentan un aumento en las concentraciones de MDA en comparación con los no expuestos. Con respecto a la peroxidación renal, la gestación no se asoció a un incremento del estrés oxidativo a nivel renal, ni con la exposición a LEV. En cuanto a la peroxidación fetal, el tiempo de gestación incrementa las concentraciones de MDA en los productos no natos. Por otra parte, la expresión del gen Slc38a4 decrementa a los 13 días e incrementa a los 18 días en el grupo expuesto a LEV en relación con el no expuesto.